柱前衍生化RP-HPLC法同时测定多肽类药物中7个生物胺的含量*

来源：药物分析杂志2022年第4期北京时间：

作者：陈小英, 王嫦鹤, 刘雪峰, 刘海静

单位：1.陕西中医药大学, 咸阳 712046; 2.陕西省食品药品检验研究院, 西安 710065

摘要：目的: 建立柱前衍生化RP-HPLC法测定注射用胸腺肽、骨肽注射液、鲑降钙素注射液、注射用谷胱甘肽、转移因子口服液和转移因子胶囊中色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺7个生物胺含量。方法: 样品经0.1mol·L-1盐酸溶液溶解,以丹磺酰氯为衍生化试剂,用反相高效液相色谱法测定。采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以含0.1%醋酸的0.01 mol·L-1醋酸铵溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~21 min,70%A→50%A;21~25 min,50%A→30%A;25~60 min,30%A;60~70 min,30%A→70%A),流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温35 ℃。结果: 色胺、2-苯乙胺、尸胺、酪胺和亚精胺的线性范围均为0.1~50 mg·L-1(r>0.999),腐胺的线性范围为0.06~31.91 mg·L-1(r>0.999),组胺的线性范围为0.10~26.12 mg·L-1(r>0.999);平均回收率在73.6%~104.0%。注射用胸腺肽检出的生物胺种类和含量最高,转移因子制剂其次,骨肽注射液中只检出组胺,鲑降钙素注射液和注射用谷胱甘肽均未检出生物胺。注射用胸腺肽检出腐胺、尸胺、组胺、酪胺和亚精胺。其中,注射用胸腺肽A企业样品中组胺和腐胺含量较高,分别约为0.113%、0.159%;B企业样品中尸胺、酪胺和亚精胺含量较高,分别约为0.373%、0.363%和0.090%;转移因子口服液和转移因子胶囊检出有腐胺、尸胺、酪胺和亚精胺。结论: 该方法准确可靠,灵敏度高,重复性好,易于操作,可用于多肽类药物中生物胺的检测。

关键词：生物胺,柱前衍生化,反相高效液相色谱法,多肽药物,注射用胸腺肽,骨肽注射液,转移因子口服液,丹磺酰氯,

基金资助：^*国家科技重大专项重大新药创制(2017Z09101001);陕西省创新能力支撑计划(2020PT-041)