银翘藿朴退热合剂中13个活性成分的定量分析*

来源：药物分析杂志2022年第4期北京时间：

作者：袁强华, 谢凡, 谈静, 林智, 盛蓉, 呼梅, 郑琰

单位：成都中医药大学附属医院, 成都 610072

摘要：目的: 采用HPLC-DAD波长切换法建立同时检测银翘藿朴退热合剂中新绿原酸、咖啡酸、绿原酸、苦杏仁苷、连翘酯苷B、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、连翘苷、牛蒡苷、厚朴酚及和厚朴酚共13个成分的定量分析方法。方法: 采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-乙腈-纯化水-磷酸四元溶剂组成的流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温40 ℃,检测波长为327 nm(0~42 min,检测新绿原酸)、207 nm(42~60 min,检测咖啡酸、绿原酸和苦杏仁苷)、327 nm(60~113.5 min,检测翘酯苷B、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C)、228 nm(113.5~144 min,检测连翘苷与牛蒡苷)、210 nm(144~160 min,检测厚朴酚与和厚朴酚)。结果: 新绿原酸、咖啡酸、绿原酸、苦杏仁苷、连翘酯苷B、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、连翘苷、牛蒡苷、厚朴酚及和厚朴酚13个成分分离度良好;13个成分的进样量分别在0.013 7~0.274 μg·mL-1(r=0.999 9),0.009 24~0.185 μg·mL-1(r=0.999 9),0.122~2.444 μg·mL-1(r=1.000),0.019 8~0.396 0 μg·mL-1(r=0.999 9),0.012 8~0.257 μg·mL-1(r=1.000),0.023 1~0.461 μg·mL-1(r=0.999 9),0.031 4~0.628 μg·mL-1(r=0.999 9),0.300~5.992 μg·mL-1(r=0.999 9),0.022 0~0.441 μg·mL-1(r=0.999 9),0.009 66~0.193 2 μg·mL-1(r=0.999 9),0.043 8~0.876 μg·mL-1(r=0.999 9),1.452×10-3~0.029 0 μg·mL-1(r=0.999 8),0.660×10-3~0.013 2 μg·mL-1(r=0.999 8)范围内与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=6)分别为100.1(RSD=0.78%)、98.9%(RSD=1.1%)、99.8%(RSD=0.72%)、99.7%(RSD=0.61%)、99.9%(RSD=0.38%)、99.6%(RSD=0.17%)、100.3%(RSD=0.87%)、99.6%(RSD=0.21%)、99.9%(RSD=0.64%)、99.6%(RSD=0.91%)、100.0%(RSD=0.55%)、99.3%(RSD=0.21%)、98.9%(RSD=0.67%)。3批中试样品中上述13个成分的含量范围依次为0.378~0.399、0.080 8~0.085 1、2.193~2.302、0.815~0.878、0.235~0.257、1.877~1.978、0.315~0.334、0.479~0.493、0.653~0.667、0.223~0.234、1.198~1.258、0.068 1~0.072 1、0.092 0~0.094 0 mg·mL-1。结论: 利用HPLC-DAD波长切换法建立的定量分析方法经验证符合要求,可同时对银翘藿朴退热合剂中13个药效成分进行定量检测,为本制剂的质量控制与评价提供了科学依据。

关键词：新型冠状病毒肺炎,银翘藿朴退热合剂,风热夹湿证,生物碱,多酚类有机酸,木脂素类化合物,HPLC-DAD波长切换法,四元流动相系统,

基金资助：^*四川省中医药管理局应急专项项目(2020yj019);四川省科技厅项目(2021YFS0410);成都中医药附属医院科技发展基金(20ZJ15)