金钱白花蛇、乌梢蛇、蕲蛇的三重PCR鉴定方法的建立*
来源：药物分析杂志2022年第5期北京时间：
作者：刘美琳, 王艳双, 姜海瀛, 孙丽媛, 李明成, 张丽华
单位：1.北华大学基础医学院, 吉林 132013; 2.北华大学医学技术学院, 吉林 132013; 3.北华大学吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心, 吉林 132013; 4.吉林雷博科技有限公司, 吉林 132013
摘要：目的: 建立金钱白花蛇、乌梢蛇、蕲蛇的三重聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法。方法: 以线粒体Cytb基因为靶基因,设计特异性引物,优化引物最适退火温度与最佳浓度比,并用该方法进行混合样品的检测。结果: 金钱白花蛇、乌梢蛇与蕲蛇的引物(浓度均10 μmol·L-1)在57 ℃时特异性均非常好,最佳浓度比为0.6∶1.0∶1.8时分别扩增出185、235、343 bp的特异性条带,混淆品及空白对照无条带。该方法能同时、准确地鉴定出混合样品的蛇源成分。结论: 本方法可同时、准确、快速地鉴定金钱白花蛇、乌梢蛇和蕲蛇样品,并适合粉末样品鉴别。
关键词：金钱白花蛇,乌梢蛇,蕲蛇,Cytb基因,三重聚合酶链式反应(PCR),鉴定,
基金资助：<sup>*</sup>吉林省科技发展计划项目(20190303093SF,20190301014NY,20200404152YY,20200403047SF);吉林省科技创新中心建设项目(20190902018TC)
