LC-MS/MS法检测替格瑞洛原料药中4,6-二氯-2-(丙硫基)-5-氨基嘧啶和5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶-4,6-二醇

来源：药物分析杂志2022年第10期北京时间：

作者：王庆鹏, 骆献丽, 陈晓英, 李原, 张明辉, 刘山崎

单位：乐普药业股份有限公司,郑州 450001

摘要：目的: 建立LC-MS/MS法检测替格瑞洛中基因毒性杂质4,6-二氯-2-(丙硫基)-5-氨基嘧啶(DCPA)和5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶-4,6-二醇(DHPN)。方法: 采用Ultimate® UHPLC XB-Phenyl色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm),以0.1%甲酸溶液为流动相A,0.1%甲酸的甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温为40 ℃;采用AB SCIEX ExionLC-QTRAP5500三重四极杆串联离子阱液质联用仪进行检测,电喷雾离子源(ESI+)、多反应监测模式(MRM),定量离子对为m/z 240.1→197.8(DCPA)、m/z 232.2→213.9(DHPN)。结果: DCPA质量浓度在0.10~16.1 ng·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 9);检测限为0.03 ng·mL-1,定量限为0.10 ng·mL-1,平均加样回收率为97.5%(RSD=9.9%,n=9);DHPN质量浓度在0.20~16.1 ng·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 5),检测限为0.06 ng·mL-1,定量限为0.20 ng·mL-1,平均加样回收率为98.1%(RSD=1.5%,n=9)。重复性和中间精密度实验中,DHPN在100%限度浓度加标供试品溶液(n=12)中的加样平均含量为7.97 μg·g-1,RSD=4.9%;供试品溶液(n=12)中DCPA的平均含量为0.94 μg·g-1,RSD=4.3%,表明精密度良好。对照品溶液、供试品溶液、加标供试品溶液中DCPA和DHPN室温放置24 h内稳定。3批替格瑞洛样品(批号Q19010701G、Q19010702G、Q19010703G)中均未检测到DHPN,DCPA的含量依次为1.2、1.1和1.1 μg·g-1,均符合规定。结论: 该方法简便、准确、可靠,可用于替格瑞洛中DCPA和DHPN的检测。

关键词：4,6-二氯-2-(丙硫基)-5-氨基嘧啶,5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶-4,6-二醇,P2Y12受体抑制剂,基因毒性杂质,替格瑞洛,液质联用,