荧光定量PCR染料法在HLA-B*5801等位基因检测中的性能评价及应用*

来源：药物分析杂志2022年第12期北京时间：

作者：梁海, 夏茹楠, 赵欢欢, 张鹏程, 鲁宁, 林紫薇, 吴炜

单位：亳州市人民医院药学部,亳州 236800

摘要：目的: 通过检测评估荧光定量聚合酶链反应(PCR)染料法对人类白细胞抗原B位点5801(HLA-B*5801)等位基因的准确性、灵敏度及其在干扰因素下的结果分析研究,同时与PCR-SBT测序法进行对比。方法: 收集45例痛风、高尿酸血症患者和20例正常人群样本,利用HLA-B*5801等位基因检测试剂盒进行检测,同时利用测序法对HLA-B等位基因高度突变的2/3/4外显子正反测序。灵敏度验证研究,随机选取1例阳性样本,按照HLA-B*5801等位基因检测试剂盒说明书要求稀释至最低浓度,检测结果与测序结果对比;抗干扰能力验证研究,随机选取3例阳性样本,加入规定要求的胆红素、脂质、阿司匹林作为干扰因素,利用PCR染料法检测,检测结果与测序结果对比。结果: 45例痛风、高尿酸患者中有8例HLA-B*5801基因阳性,阳性率为17.8%;20例正常人群则有1例携带HLA-B*5801基因,阳性率5%。最低浓度样本也可正确检出结果,PCR染料法的准确性、灵敏性、特异性均为100%;3例阳性患者在胆红素、脂质等干扰物质影响下仍可正常检出,抗干扰能力良好。结论: PCR染料法可正确检测HLA-B*5801基因,灵敏度较好且在干扰物质存在的状况下结果不受影响,与测序结果一致,且操作更快捷方便。

关键词：PCR染料法,HLA-B*5801,准确性,灵敏度,抗干扰能力,

基金资助：^*安微省重点研究与开发计划项目(1804h08020296);亳州市重点研发计划项目(bzzc2021022);亳州市人民医院科研孵化项目(Byf202005)