基于液质联用技术的溶菌酶一级结构分析研究*

来源：药物分析杂志2023年第1期北京时间：

作者：尹红锐, 张颖, 方欣欣, 陈钢, 邵泓, 郑璐侠

单位：1.上海市食品药品检验研究院,上海 201203; 2.国家药监局治疗类单抗质量控制重点实验室,上海 201203; 3.复旦大学药学院,上海 201203

摘要：目的: 使用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法(UPLC-Q TOF MS法)对国内外3家企业溶菌酶的一级结构进行分析研究。方法: 采用BEH300 C4(50 mm×2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱和BEH300 C18(150 mm×2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱,以0.1%甲酸/水溶液为流动相A,0.1%甲酸/乙腈溶液为流动相B,梯度洗脱,流速0.2 mL·min-1;采用Q TOF MS的电喷雾正离子模式,相对分子质量测定时采用MS模式进行扫描,氨基酸序列和二硫键连接方式测定时采用MSE模式进行扫描。结果: 3种来源溶菌酶相对分子质量与理论值一致;肽图结果显示各样品的氨基酸序列均与理论一致;二硫键连接方式均为Cys6-Cys127、Cys30-Cys115、Cys64-Cys80、Cys76-Cys94。结论: UPLC-Q TOF MS法可用于溶菌酶一级结构的分析。

关键词：溶菌酶,一级结构,超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱,相对分子质量,氨基酸序列,二硫键,

基金资助：*国家药典委员会药品标准提高课题(2017-206)