离子交换层析结合分子排阻色谱法测定注射用尿激酶中分子组分比*

来源：药物分析杂志2023年第1期北京时间：

作者：严翠霞, 尹红锐, 史芳亮, 陈钢, 郑璐侠, 邵泓

单位：1.上海市食品药品检验研究院,上海 201203; 2.国家药监局治疗类单抗质量控制重点实验室,上海 201203

摘要：目的: 建立测定注射用尿激酶分子组分比的离子交换层析样品前处理方法结合分子排阻色谱法的分析方法,以解决长期以来制剂标准中无法控制分子组分比的难题,并对国内6家企业的产品质量进行了考察。方法: 根据尿激酶与人血白蛋白等电点的差异,通过离子交换层析去除样品中人血白蛋白辅料的干扰,采用分子排阻色谱法测定。采用TSKgel G2000SWXL色谱柱(300 mm×7.8 mm,5 μm),流动相为0.1 mol·L-1磷酸二氢钠缓冲液(pH 3.0),流速为0.5 mL·min-1,柱温为35 ℃,检测波长为280 nm,进样量为50 μL。结果: 尿激酶质量浓度在0.05~5.1 mg·mL-1范围内,高分子量尿激酶与低分子量尿激酶线性关系均良好(r≥0.998 0);检测限分别为1.5 μg·mL-1与5.1 μg·mL-1,定量限分别为5.1 μg·mL-1与16.9 μg·mL-1;精密度、重复性、24 h稳定性试验的RSD均＜4.0%;方法的回收率为92.5%~97.0%;18批样品中高分子量尿激酶与低分子量尿激酶的相对含量范围分别为82.8%~96.5%与3.5%~17.2%。结论: 建立的离子交换层析结合分子排阻色谱法可用于注射用尿激酶中分子组分比的测定,弥补了注射用尿激酶现行国家标准中分子组分比测定的空白。

关键词：注射用尿激酶,高分子量尿激酶,低分子量尿激酶,分子组分比,离子交换层析,分子排阻色谱,

基金资助：*国家药典委员会课题(2018H081)