柱前衍生化高效液相色谱法用于生地黄和熟地黄中多糖的分析研究

来源：药物分析杂志2023年第4期北京时间：

作者：李明华, 孙红梅, 程显隆, 魏锋, 马双成

单位：1.中国食品药品检定研究院,北京 102629; 2.无限极(中国)有限公司,江门 529100

摘要：目的: 测定生地黄和熟地黄中多糖的单糖组成及含量,分析生地黄和熟地黄之间的差异。方法: 采用三氟乙酸对提取的生地黄和熟地黄中的多糖进行酸水解,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)对酸解后的单糖进行衍生化。采用Waters Symmetry-C18(250 mm×4.6 mm, 5 μm)色谱柱,以0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 6.8)为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长250 nm,柱温30 ℃。采用主成分分析和方差分析,对地黄多糖水解后各单糖含量及其比值进行分析。结果: 半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖进样质量依次在0.02~1.82、0.10~3.91、0.09~7.08和0.03~1.69 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.999 3),回收率为97.6%~103.7%,重复性RSD(n=6)为3.2%~4.7%,中间精密度均符合要求。生地黄和熟地黄多糖水解后均含有上述4个单糖,二者差异不明显,但生地黄中葡萄糖含量/半乳糖含量比值＞0.4,熟地黄中此比值基本＜0.4。结论: 本方法重复性好,准确度高,可用于生地黄和熟地黄样品中多糖水解产物单糖的含量测定;生地黄和熟地黄之间葡萄糖含量/半乳糖含量比值存在一定程度差异。

关键词：生地黄,熟地黄,半乳糖醛酸,葡萄糖,半乳糖,阿拉伯糖,柱前衍生化高效液相色谱法,