二维液相色谱-三重四极杆串联质谱对富马酸丙酚替诺福韦片美拉德反应杂质的结构分析及检测方法研究*

来源：药物分析杂志2023年第6期北京时间：

作者：章海云, 宿亮, 谢玲玲, 张子轩, 朱婧, 袁秀菊

单位：株洲千金药业股份有限公司,株洲 412000

摘要：目的: 应用在线脱盐-二维液相色谱-三重四极杆串联质谱(2D-LC-MS/MS)对富马酸丙酚替诺福韦片中美拉德反应杂质进行质谱结构鉴定,并建立专属检测方法。方法: 将富马酸丙酚替诺福韦、乳糖、水混合后经90 ℃水浴破坏18 h获得美拉德反应杂质,采用Waters XTerra MS C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以0.02 mol·L-1磷酸盐(1 mol·L-1氢氧化钾溶液调节至pH 6.0)-甲醇(95∶5)为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱,对美拉德反应杂质进行分离及捕集,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS/MS)对捕集成分进行脱盐及多级质谱分析;采用ZORBAX Eclipse Plus C18(50 mm×3.0 mm,1.8 μm)为色谱柱,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱;以电喷雾源(ESI)正离子多反应监测(MRM)模式检测,雾化气为氮气(压力0.31 MPa),干燥气为氮气(6 L·min-1),干燥气温度为350 ℃。结果: 通过多级质谱数据分析,破坏溶液中共鉴定出3个美拉德反应杂质的结构,分别为替诺福韦单苯酯乳糖加合物、丙酚替诺福韦乳糖加合物、替诺福韦乳糖加合物;3个杂质的定量检测离子对分别为m/z 688.5→406.4、801.5→477.4、612.3→288.2。结论: 该研究为富马酸丙酚替诺福韦片的处方筛选及质量控制提供了有效的方法依据。

关键词：富马酸丙酚替诺福韦片,抗病毒药,美拉德反应,有关物质,乳糖加合物,结构鉴定,质量控制,

基金资助：*2022年度湖南省自然科学基金-科药联合基金(2022JJ80122);中央引导地方科技发展专项资金合同(2017CT5023)