基于环介导等温扩增技术的中药材蕲蛇真伪鉴别方法的建立*

来源：药物分析杂志2023年第7期北京时间：

作者：邓华明, 徐晓可, 黄启红, 李子行, 梁林源, 余至兴, 梁永恒

单位：1.广东岭南职业技术学院护理与健康学院,广州 510663; 2.广东省科学院测试分析研究所(中国广州分析测试中心),广州 510070; 3.广东岭南职业技术学院药学院,广州 510663; 4.茂名市人民医院药剂科,茂名 525000

摘要：目的: 建立基于环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)的蕲蛇快速检测方法,实现中药蕲蛇的可视化快速鉴定。方法: 依据《中华人民共和国药典》收录的蕲蛇特异性序列设计4条LAMP引物(2条内引物、2条外引物),建立蕲蛇LAMP的鉴别方法,对比《中华人民共和国药典》收录的聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction,PCR)方法的检测结果,评价LAMP的鉴别方法的特异性和灵敏度,并采用LAMP鉴别方法和PCR方法鉴别市售蕲蛇的真伪。结果: 使用该引物建立的蕲蛇LAMP鉴别方法对蕲蛇对照药材和4份市售蕲蛇样本产生扩增,对1份市售蕲蛇样本和8种蕲蛇混淆品样本无扩增,与PCR鉴别结果一致,说明蕲蛇的LAMP鉴别方法具有良好的特异性。LAMP检测的灵敏度在DNA水平上达到0.004 ng·μL-1,PCR检测的灵敏度为0.4 ng·μL-1,因而LAMP检测具有较高的灵敏度。结论: 本研究建立的LAMP检测方法可以应用于中药材蕲蛇真伪的快速鉴别。

关键词：蕲蛇,环介导等温扩增技术,核酸等温扩增技术,聚合酶链式反应,中药真伪鉴别,分子检测,快速鉴定,

基金资助：^*广东省普通高校青年创新人才项目(2020KQNCX243);广东省中医药局科研项目(20221291)