《药物分析杂志》发表论文赏析
作者:徐宁, 马玉贺, 马秋贺, 艾金霞, 母润红, 高丽君, 夏薇
单位:1.北华大学医学技术学院,吉林 132013; 2.北华大学基础医学院,吉林 132013
摘要:目的: 建立1种双重PCR检测体系,根据琼脂糖凝胶电泳目的条带位置及数量快速鉴定花鹿茸、马鹿茸及常见伪品驯鹿茸。方法: 采用碱变性法提取鹿茸样品基因组DNA,以鹿科动物Cytb和COI基因为靶序列,应用Primer 3.0,根据SNP位点设计特异性鉴别引物(Cy-1、COI-1),并摸索及优化PCR反应体系及条件,同时,采用克隆及测序验证检测结果的准确性。结果: 建立的双重PCR扩增体系显示,花鹿茸在电泳图谱408 bp及146 bp处可见2条扩增条带,马鹿茸则在146 bp处见1条目的条带,而伪品鹿茸则无扩增条带,与质粒克隆测序验证的结果一致。且市售鹿茸样品的检测结果与鉴定结果相吻合。结论: 本试验自主构建的双重PCR检测体系简便、迅速,检测试剂结果准确,稳定性良好,在分子水平实现一步法鉴定花鹿茸、马鹿茸及其常见伪品,具有较大实用价值。
关键词:花鹿茸,马鹿茸,双重聚合酶链式反应,位点特异性,检测试剂,
基金资助:<sup>*</sup>吉林省科技发展计划项目资助(20230401096YY、20200403047SF、20210204185YY);吉林省科技厅重点科技成果转化项目资助(20170307001YY)