UHPLC-MS分析人促红素产品中CHO宿主细胞蛋白残留*

来源：药物分析杂志2023年第8期北京时间：

作者：于雷, 秦玺, 张晓夕, 史新昌, 李响, 周勇

单位：1.中国食品药品检定研究院,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京 100050; 2.赛默飞世尔科技(中国)有限公司,上海 201210

摘要：目的: 利用超高效液相色谱-质谱联用技术(UHPLC-MS)分析人促红素(human erythropoietin, hEPO)产品中CHO宿主细胞蛋白(host cell protein, HCP)残留。方法: 将hEPO原液和蛋白标准品一起进行变性、还原烷基化、酶切处理;采用Accucore Vanquish C18色谱柱串联超高效液相色谱和Q ExactiveTM Plus 组合型四极杆 OrbitrapTM质谱仪对样品进行分离和检测;使用BioPharma Finder 4.1软件中的HCP工作流程进行定性及定量分析。结果: 10种HCP在4批hEPO原液样品中均被检测到,且不同样品中HCP总量有较大差异,从25×10-6至约1 000×10-6;含量>50×10-6的HCP,CV值均<10%。结论: UHPLC-MS法可对CHO细胞表达的hEPO产品中HCP进行定性定量分析,不同来源hEPO样品中HCP种类和含量均有差异。

关键词：人促红素,CHO细胞表达系统,宿主细胞蛋白,超高效液相色谱-质谱联用技术,中国仓鼠全蛋白库,

基金资助：^*国家质量基础设施体系(2021YFF0600804)