LC-MS/MS法测定中国孕妇胎盘中地塞米松相关代谢酶和转运体蛋白丰度*

来源：药物分析杂志2024年第1期北京时间：

作者：李辉, 郭萱, 侯哲, 刘东阳, 董静, 杭太俊, 张雷

单位：1.北京大学第三医院,北京 100191; 2.中国药科大学,南京 210009; 3.岛津中国创新中心,北京 100020

摘要：目的:建立LC-MS/MS方法测定中国孕妇胎盘中地塞米松相关代谢酶和转运体的丰度数据。方法:采用Shim-pack GISS-HP C18(100 mm×2.1 mm, 1.9 μm)色谱柱,柱前由0.2%甲酸-水(A)和0.2%甲酸-乙腈(B)组成的流动相,以0.2 mL·min-1的流速进行梯度洗脱,柱后以0.1 mL·min-1的流速加入0.5%乙二醇-乙腈(流动相C),采用ESI源正离子MRM模式进行定量分析。对所建立的方法进行方法学考察并对中国孕妇孕晚期胎盘中11β羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)、11β羟基类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)、细胞色素P450 3A4酶(CYP3A4)和P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达量进行定量分析。结果:建立的LC-MS/MS分析测定方法的线性范围为0.1~100 nmol·L-1(r>0.999);精密度和准确度结果均符合《中华人民共和国药典》对于生物样品分析方法学验证的要求(RSD≤15%),稳定性结果显示样品稳定性良好。11β-HSD2、11β-HSD1、CYP3A4和P-gp的蛋白丰度分别为(84.46±59.97) pmol·g-1、(11.44±3.73) pmol·g-1、 (8.83±2.78) pmol·g-1和(7.94±4.10) pmol·g-1。同时研究结果显示相关代谢酶和转运体在胎盘不同部位的分布没有显著差异,但中国人胎盘P-gp的丰度(7.94±4.10) pmol·g-1和白人(4.41±2.46) pmol·g-1相比存在显著性差异。结论:本研究建立的LC-MS/MS方法准确度和灵敏度高,适用于检测人类胎盘中地塞米松相关代谢酶和转运体的丰度值。

关键词：液相色谱-二级质谱联用,细胞色素P450 3A4酶,P-糖蛋白,11β羟基类固醇脱氢酶,蛋白丰度,孕妇胎盘,地塞米松,

基金资助：^*国家自然科学基金(No.82173895)