固相萃取-HPLC法测定艾地骨化醇软胶囊中有关物质*

来源：药物分析杂志2024年第6期北京时间：

作者：李洁, 王清亭, 张丽敏, 张佳鸿, 刘振飞, 陈阳生

单位：正大制药(青岛)有限公司,青岛 266000

摘要：目的: 建立一种氨基固相萃取-HPLC法测定艾地骨化醇软胶囊中3个同分异构体的有关物质。方法: 采用氨基固相萃取法,经乙酸乙酯-正己烷洗脱,无水乙醇提取,提取液经减压蒸干后用乙腈复溶,经ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分析,以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,进样量为50 μL,采用紫外检测器,在检测波长265 nm处检测有关物质。结果: 固相萃取前处理可有效去除空白油干扰,艾地骨化醇与各杂质均可基线分离;在低温4 ℃条件下考察溶液稳定性,24 h时供试品溶液中各杂质面积百分比为98.6%~102.3%;杂质对照品溶液中,24 h时Tachy杂质、前体、艾地骨化醇和Trans杂质的面积百分比分别为101.2%、96.9%、98.5%和96.2%;艾地骨化醇、trans杂质、前体和tachy杂质的定量限分别为0.107、0.102、0.128、0.063 μg·mL-1,检测限分别为0.054、0.051、0.064、0.031 μg·mL-1;四者质量浓度分别在0.1~6.3 μg·mL-1、0.1~1.2 μg·mL-1、0.1~5.6 μg·mL-1和0.1~1.1 μg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数(n=5)分别为0.999 9、1.000、1.000和0.999 4;tachy杂质、前体和trans杂质回收率(n=6)分别为106.6%、88.6%和102.8%,RSD(n=6)分别为6.7%、3.1%和2.1%。3批样品含前体5.0%、5.0%和5.1%,杂质tachy、杂质Trans和未知单杂均未检出。结论: 该方法操作简单,经济实用,安全性高,专属性强,重复性好,准确度高,为艾地骨化醇软胶囊及类似油性基质的药物质量研究提供可靠依据。

关键词：固相萃取,艾地骨化醇软胶囊,油性基质,活性维生素D,同分异构体,有关物质,

基金资助：*泰山产业领军人才工程资助(tscx202211121)