制药用水及受控环境中寡营养微生物的生物负载监测*

来源：药物分析杂志2024年第11期北京时间：

作者：范一灵, 李琼琼, 王培恩, 杨美成

单位：1.中国医药工业研究总院,上海 201203;2.国家药品监督管理局药品微生物检测技术重点实验室,上海市创新生物制品质量检验检测中心,上海市食品药品检验研究院,上海 201203;3.上海市食品药品包装材料测试所,上海 201203

摘要：目的:筛选适用于制药环境中寡营养微生物的监测方法,了解制药用水及洁净环境等寡营养条件下的生物负载及微生物特征。方法:通过比较R2A和TSA培养基对实验室纯水中微生物在不同温度、培养基及培养时间的计数结果比较,优化寡营养条件下微生物的培养条件和检测方法。以传统方法与寡营养检测方法同时开展制药生产环境中寡营养微生物的监测,结合16s rDNA测序和MALDI-TOF MS等技术,对分离的微生物开展多相微生物鉴定及分析。结果:菌落计数方法、培养基种类和培养时间在微生物计数中有显著性影响,采用寡营养R2A培养基分离环境微生物的效果优于TSA培养基。上述2种培养基的微生物分离谱差异较大,在R2A培养基中革兰阴性菌的分离率可达37.0%,在TSA培养基中革兰阴性菌的分离率仅为14.0%。此外,初次分离于R2A培养基的多株条件致病微生物在TSA培养基中生长缓慢,在传统监测方案中易被漏检。结论:随着制药工艺的发展,以革兰阳性球菌为主的人源性微生物污染比例将逐步下降,适时选用寡营养微生物监测方法作为传统技术的补充,有助于在早期发现生产环境中潜在的不可接受微生物污染风险。

关键词：寡营养微生物,制药用水,受控环境,生物负载,不可接受微生物,

基金资助：*上海市药品监督管理局监管科学研究项目(ZD-2023-06);中国医药工业研究总院研究生创新基金项目(YJS2022009)