环孢霉素A、他克莫司、西罗莫司、依维莫司冰冻人全血国家标准品的研制*

来源：药物分析杂志2025年第5期北京时间：

作者：于婷, 沈敏, 黄杰, 张天娇

单位：1.中国食品药品检定研究院,北京 100050; 2.美康生物参考实验室,宁波 315104; 3.北京医院国家老年医学中心 国家卫生健康委临床检验中心 中国医学科学院老年医学研究院 中国医学科学院北京协和医学院,北京 100730

摘要：目的: 研制环孢霉素A、他克莫司、西罗莫司、依维莫司冰冻人全血国家标准品。方法: 收集无明显溶血、黄疸、脂血的抗凝全血样品,混合传染病四项全阴的全血,-20 ℃以下冷冻48 h以上,解冻后离心（4 000×g,10 min）,弃沉淀,加入环孢霉素A、他克莫司、西罗莫司、依维莫司的纯品原料,配制成目标浓度,充分混匀,再分装制备成2个水平标准品。分别采用单因素方差法和线性回归法评估标准品的均匀性和稳定性;采用参考方法为标准品定值,并计算不确定度;最后再进行互换性评估。结果: 环孢霉素A、他克莫司、西罗莫司、依维莫司水平Ⅰ的均匀性检验F值分别为1.492 1、1.395 6、1.432 8和1.060 2,水平Ⅱ的均匀性检验F值分别为1.441 2、1.476 1、1.458 0和1.454 6,均<F0.05;标准品水平Ⅰ在20~25 ℃和2~8 ℃条件下可稳定10 d,-20 ℃条件下可稳定30 d;标准品水平Ⅱ在20~25 ℃条件下可稳定10 d,在2~8 ℃、-20 ℃条件下可稳定30 d。定值结果（k=2）：环孢霉素A水平Ⅰ为（105.6±8.9）ng · mL-1,水平Ⅱ为（419.8±32.8）ng · mL-1;他克莫司水平Ⅰ为（5.4±0.4）ng · mL-1,水平Ⅱ为（17.0±1.8）ng · mL-1;西罗莫司水平Ⅰ为（5.0±0.3）ng · mL-1,水平Ⅱ为（15.7±1.1）ng · mL-1;依维莫司水平Ⅰ为（4.8±0.2）ng · mL-1,水平Ⅱ为（10.2±0.6）ng · mL-1。2个水平标准品浓度均在新鲜全血样本的回归直线95%可信区间范围内,互换性良好。结论: 该批环孢霉素A、他克莫司、西罗莫司、依维莫司冰冻人全血国家标准品均匀稳定,具有互换性,定值准确,可作为国家标准品用于这4项免疫抑制剂检测的校准,对检测结果的标准化和一致化具有重要意义。

关键词：环孢霉素A,他克莫司,西罗莫司,依维莫司,全血,国家标准品,

基金资助：中央高水平医院临床科研业务费资助：北京医院医工结合专项（BJ-2023-106）