UPLC-Q TOF MS/MS法测定谷赖胰岛素注射液一级结构*

来源：药物分析杂志2025年第6期北京时间：

作者：毛紫娟, 徐艳梅, 乔晓宁, 高燕霞

单位：1.河北科技大学 化学与制药工程学院, 石家庄 050091; 2.河北省药品医疗器械检验研究院国家药品监督管理局仿制药质量控制与评价重点实验室, 石家庄 050227

摘要：目的: 使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法（UPLC-Q TOF MS/MS）对速效胰岛素制剂谷赖胰岛素注射液一级结构进行测定。方法: 使用二硫苏糖醇（DTT）和碘乙酰胺（IAM）对谷赖胰岛素注射液进行还原烷基化前处理,通过UPLC-Q TOF MS/MS分析其一级结构。氨基酸序列测定采用Waters ACQUITY UPLC CSH C18色谱柱（3 mm×150 mm,1.7 μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液,流动相B为0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.3 mL · min-1;采用电喷雾离子源正离子模式和MSE采集模式进行数据采集,通过优化质谱参数,对谷赖胰岛素注射液进行一级结构测定,同时考察该方法对精蛋白重组人胰岛素注射液的适用性。结果: 谷赖胰岛素A链与B链一级质量数准确,氨基酸序列覆盖率良好,通过b/y离子分析,A链和B链前5个强度高的b/y离子的离子强度RSD均在10.0%以内,专属性强,重复性好,对精蛋白重组人胰岛素注射液也具有良好的适用性。结论: 该方法操作简便快速、灵敏、准确,可用于谷赖胰岛素注射液及其他胰岛素类似物制剂的一级结构测定。

关键词：糖尿病,谷赖胰岛素,超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱,一级结构,氨基酸序列,

基金资助：^*中央引导地方科技发展资金项目（216Z4802G）