金钱白花蛇的环介导等温扩增快速鉴别*

来源：药物分析杂志2025年第8期北京时间：

作者：王溪, 张金聚, 钟文婷, 马志国, 吴孟华, 曹晖, 张英

单位：1.暨南大学药学院 暨南大学岭南传统中药研究中心,广州 510632; 2.国家中药现代化工程技术研究中心岭南资源分中心 广东省中医药信息化重点实验室,广州 510632

摘要：目的: 建立基于环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）的金钱白花蛇分子鉴定方法,实现金钱白花蛇的可视化快速鉴定。方法: 针对金钱白花蛇cyt B序列设计特异性引物2对（外引物YHS-F3和YHS-D3、内引物YHS-FIP和YHS-BIP）,在含有Bst DNA聚合酶和SYBR Green Ⅰ指示剂的反应体系下,于60 ℃下恒温扩增60 min,目测检视并判断反应结果。与DNA条形码和聚合酶链式反应（PCR）鉴定方法进行对比,考察方法专属性和灵敏度。结果: 10批金钱白花蛇样品均由橙色变为绿色,其余蛇类样品均为橙色,鉴别结果与DNA条形码及PCR结果一致,LAMP检测限为1×10-6 μg · mL-1。结论: 本文建立的LAMP检测方法准确,灵敏度高,操作简便快捷,对设备要求低,可应用于金钱白花蛇的快速鉴别。

关键词：金钱白花蛇,环介导等温扩增技术,中药鉴别,快速鉴别,

基金资助：国家重点研发计划（2023YFC3504200）;曹晖全国名老中医药专家传承工作室建设项目（国中医药人教函〔2022〕75号）