基于一种高灵敏度的LC-MS/MS方法定量检测SD大鼠脑组织中AB-38b的含量

来源：药物分析杂志2025年第9期北京时间：

作者：沙翩, 潘丹丹, 顾竹林, 秦亚玮

单位：1.徐州医科大学附属医院药学部,徐州 221004;2.徐州医科大学药学院,徐州 221004

摘要：目的: 通过建立一种高灵敏度的分析方法,定量检测正常大鼠脑组织中AB-38b的浓度,进一步去揭示AB-38b在大鼠脑内的药代动力学过程。方法: 选择托伐普坦作为内标,脑组织样品采用甲醇进行蛋白质沉淀预处理。采用Shim-pack VP-ODS C18（2.0 mm×150 mm,5 μm）色谱柱,以乙酸铵-甲醇为流动相,流速0.2 mL · min-1,柱温40 ℃,自动进样器温度4 ℃,进样体积5 µL。离子化方式为电喷雾电离,采用多重反应监测模式正离子检测AB-38b（m/z 705.2→618.3）,托伐普坦（m/z 449.3→252.2）。此方法经过全面的方法学验证,涵盖标准曲线与定量下限的确立、残留效应考察、准确度与精密度的验证、基质效应的探究,以及提取回收率的测定等多个关键环节。雄性SD大鼠（240±14 g）30只,随机分为5组,每组6只,禁食但可自由饮水12 h后进行单次灌胃给药,给药剂量为50 mg · kg-1,于给药后0、15、50、90和480 min称取大鼠体质量并以二氧化碳吸入法进行安乐死,取出大脑组织,并称取各组质量,加入磷酸盐缓冲液制备组织匀浆,按组织样品处理方法处理后,经LC-MS/MS检测大鼠脑组织中AB-38b的浓度。结果: AB-38b质量浓度在2.5~150 ng · ml-1范围内线性关系良好（R2>0.999）,定量下限为2.5 ng · ml-1;其日内精密度和日间准确率分别为88.54%~104.56%和95.24%~102.31%,精密度（RSD）均<9%、AB-38b和IS在大鼠脑组织匀浆样品中的提取回收率为81.9%~95.9%,RSD<15%;AB-38b的基质效应范围为87.74%~96.21%,RSD<15%;AB-38b保留时间处残留峰面积小于LLOQ峰面积的20%,内标保留时间处残留峰面积小于峰面积的5%;AB-38b在脑组织匀浆中室温下储存6 h、三次冻融循环下、进样器中24 h、长期（-80 ℃）储存60 d条件下是稳定的,RSD均<12.7%,结果提示,准确度与精密度、提取回收率、基质效应、残留效应、稳定性等均符合接受标准。结论: 本研究建立的LC-MS/MS检测方法检测快速,灵敏度高,特异性强,能够准确测定大鼠脑组织中AB-38b的含量。

关键词：AB-38b,分析检测方法建立,液相色谱-串联质谱,SD大鼠,脑组织,