B群链球菌多糖蛋白结合物中游离蛋白含量测定方法*

来源：药物分析杂志2025年第9期北京时间：

作者：普莉珍, 寇雅蓉, 孙雯倩, 刘票, 杨成良, 王会梅, 仝鑫

单位：1.云南疫苗实验室有限公司,云南昆明, 650032;2.云南沃森生物技术股份有限公司,云南昆明, 650032

摘要：目的: 建立毛细管电泳-激光诱导荧光（CE-LIF）法检测多糖蛋白结合物中游离蛋白含量的方法,并对方法进行验证及初步应用。方法: 在预处理后的多糖蛋白结合物中加蛋白标记液和Chromeo P503荧光试剂标记,标记后加去离子水终止反应,再通过CE进行分离后用LIF检测器对游离蛋白进行检测。同时进行了方法学验证（专属性、检测限和定量限、线性与范围、精密度、准确度、溶液稳定性和耐用性）。结果: 该方法游离蛋白在0.05~20 μg · mL-1这一浓度范围内,待测组分检测峰面积与进样量呈良好线性关系,决定系数R2≥0.98;精密度的RSD均小于5.0%;供试品回收率为108.1%,RSD为8.1%;检测限浓度为0.201 μg · mL-1,定量限浓度为0.609 μg · mL-1。采用毛细管电泳能够很好地实现工艺样品中游离蛋白测定,并符合检测要求（参考A群C群脑膜炎多糖结合疫苗结合物原液检定项下：游离蛋白含量应不高于5%）结论: 建立了多糖蛋白结合物中游离蛋白含量的检测方法,具有良好的线性、准确度、精密度、耐用性,该方法可应用于多价B群链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗及原液、多价肺炎球菌多糖蛋白结合疫苗及原液的质量控制。

关键词：游离蛋白,破伤风类毒素,毛细管电泳-激光诱导荧光,多糖蛋白结合疫苗,含量测定,

基金资助：云南省科技厅项目（2019ZF007）