基于PCR-RFLP方法对酸枣仁和理枣仁真伪鉴别研究*
来源：药物分析杂志2025年第11期北京时间：
作者：赖晶, 马莉雅, 靳婉君, 蔺瑞丽, 史小亚, 马潇, 宋平顺, 张明童, 何小英
单位：甘肃省药品检验研究院 国家中药材及饮片质量控制重点实验室,兰州 730000
摘要：目的：建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,以实现酸枣仁及其常见伪品理枣仁的快速鉴别。方法：对酸枣仁和理枣仁的核糖体DNA内转录间隔区（ITS）序列进行限制性酶切位点分析,筛选出酸枣仁限制性酶切位点PaeR7I（C^TCGAG）,以及理枣仁限制性酶切位点Hpy188I（TCN^GA）,设计PCR-RFLP引物,并优化PCR-RFLP反应的关键参数,包括退火温度、循环数、底物量及酶切时间。结果：建立了酸枣仁、理枣仁的PCR-RFLP鉴别方法,在最佳反应条件下[退火温度为58~60 ℃、30个循环、鉴别引物（10 μmol · L-1）各0.5 μL],经PaeR7I酶酶切后,酸枣仁产生2条特异性DNA条带,理枣仁则无此条带;经Hpy188I酶酶切后,理枣仁产生2条特异性DNA条带,酸枣仁则无此条带。该方法具有良好的专属性,灵敏度高,可检测出掺有5%的理枣仁。结论：建立的PCR-RFLP法稳定性好,准确度高,可有效鉴别酸枣仁及其掺伪品理枣仁,为解决酸枣仁的质量控制问题提供了可靠的技术手段。
关键词：酸枣仁,理枣仁,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性,鉴别,
基金资助：<sup></sup>国家中药材及饮片质量控制重点实验室项目（2023GSMPA-KL04）
