首批5型腺病毒E1区线性化质粒国家标准品的研制*

来源：药物分析杂志2025年第11期北京时间：

作者：于雷, 王光裕, 傅建宁, 史新昌, 魏长龙, 周勇, 付志浩, 梁成罡

单位：1.中国食品药品检定研究院 卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,北京 100050; 2.沈阳药科大学,沈阳 110000

摘要：目的：研制首批5型腺病毒E1区线性化质粒国家标准品,用于HEK293细胞生产的重组腺相关病毒和腺病毒中E1残留测定。方法：构建包含5型腺病毒E1区的质粒,转化入大肠杆菌,扩增培养后提取质粒,Sca I单酶切进行线性化处理。采用数字PCR法对E1拷贝数进行标定,并进行均匀性和稳定性评估。结果：经6家实验室协作标定,该候选标准品的E1拷贝数为1.07×1010 copies · mL-1,95% CI为1.04×1010~1.09×1010 copies · mL-1;均匀性评估结果显示样品间无显著差异（单因素方差分析,p=0.098 7）;稳定性研究显示-20 ℃以下储存12个月,E1拷贝数未见明显降低。结论：本研究成功建立了首批5型腺病毒E1区线性化质粒国家标准品,对实现 E1 拷贝数检测的标准化与结果一致性具有重要意义。

关键词：5型腺病毒E1区,线性化质粒,国家标准物质,定量聚合酶链式反应,数字PCR,

基金资助：中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费项目基因治疗药物和mRNA疫苗等新型生物制品的质量评价及相关机制研究（2023-PT350-01）