基于QbD理念优化胶束毛细管电泳检测肺炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白含量的方法

来源：药物分析杂志2025年第11期北京时间：

作者：何静, 张涛, 陈思, 刘威, 蔡峰

单位：成都生物制品研究所有限责任公司,成都 610023

摘要：目的：基于质量源于设计（quality by design,QbD）理念,优化检测肺炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）含量的胶束毛细管电泳法（MEKC法）。方法：以33 cm（有效长度24.5 cm）×50 µm未涂渍熔融石英毛细管为分离柱,于200 nm波长下检测。采用线性模型（linear models）筛选关键方法参数（CMPs）,再用中心复合表面设计模型（central composite design,CCD）对4个CMPs（分离电压、进样时间、硼酸盐浓度、缓冲液的pH）进行优化,以分离度、TT的峰面积和峰高为分析方法目标,建立CMPs的设计空间。结果：确定了CMPs的最优检测条件：以50×10-3 mol · L-1硼酸盐-SDS缓冲液（pH 9.0）为电泳介质,UV检测波长200 nm,进样时间为5 s,电泳电压为8.5 kV。方法验证结果显示,该方法专属性、精密度、准确度良好,TT质量浓度在5~100 mg · L-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 9;TT的定量限为5 mg · L-1,检测限为2 mg · L-1;加样回收率在90%~110%内;重复性RSD≤10%,精密度RSD≤10%。结论：本文将QbD理念运用于疫苗制品的质量研究中,获得了稳健可靠的游离TT含量测定方法,为科学制定疫苗产品质量标准奠定基础。

关键词：QbD理念,胶束毛细管电泳法（MEKC法）,破伤风类毒素（TT）,游离蛋白,关键方法参数（CMPs）,