单抗类药物低丰度宿主细胞残留蛋白液相色谱串联质谱检测分析

来源：药物分析杂志2025年第12期北京时间：

作者：余捷婧, 李炎, 马全刚, 豆敏华, 邵宇皓, 杨志行, 曾实

单位：1.四川省药品检验研究院 四川省药品监督管理局生物制品质量监测与风险评估重点实验室,成都 611731; 2.湖州申科生物技术股份有限公司,湖州 313000

摘要：目的：建立单抗类药物低丰度宿主细胞蛋白（HCPs）残留质谱检测方法,以支持单抗类药物的质量控制。方法：通过非变性酶解结合脱氧胆酸钠变性酶解的方法处理单抗样品,使用纳升液相色谱-串联高分辨质谱（nanoLC-ESI-Orbitrap）对处理后的样品检测。采用Acclaim PepMap RSLC C18（75 µm×25 cm,2 µm）色谱柱,Acclaim PepMap 100 C18（100 Å,75 µm×15 cm,3 µm）Trap柱,以0.1%甲酸水（A）-0.1%甲酸乙腈（B）为流动相,以数据依赖采集的质谱扫描为采集模式,对建立方法的检测限、精密度、重现性等进行考察,并应用于单抗样品的HCPs残留检测,高风险蛋白注释,同时引入内标蛋白回收率作为校正因子,以相对定量的方式分析HCPs残留量。结果：应用建立的单抗类药物低丰度HCPs残留蛋白液相色谱串联质谱检测方法,对26个单抗样品进行检测,样品中HCPs残留量在47.0~103.5 ng · mg-1。鉴定到高风险蛋白磷脂酶B样蛋白,残留量在41.9~100.3 ng · mg-1,约占HCPs总残留量的90%。结论：本研究建立的LC-MS分析方法稳定性及精密度好,方法可靠,适用于单抗类药物低丰度HCPs残留检测。

关键词：宿主细胞蛋白,单抗类药物,液相色谱-串联质谱,低丰度蛋白,高风险残留蛋白,