金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇可视化环介导等温扩增检测方法的建立与应用*

来源：药物分析杂志2026年第1期北京时间：

作者：张红, 张珈晨, 王洪阳, 朱文赫, 李亚巍

单位：吉林医药学院,吉林 132013

摘要：目的：建立一种高效、准确,灵敏度高的动物源中药材的环介导等温扩增检测方法。方法：针对金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇的Cytochrome b基因序列,设计环介导等温扩增（LAMP）引物,对其进行扩增并连接至载体pUC57,构建重组质粒DNA,建立可视化LAMP检测体系。通过设置62~66 ℃温度梯度,确定62 ℃为金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇的最适反应温度。对比LAMP与聚合酶链反应（PCR）2种检测方法的敏感性和特异性。选择最优LAMP检测方法用于市售蛇源中药材的检测。结果：试验成功建立了用于检测金钱白花蛇、蕲蛇、乌梢蛇的LAMP试验反应体系,该体系在62 ℃下反应40 min,即可通过肉眼直接观察测定结果。敏感性试验显示,金钱白花蛇、蕲蛇和乌梢蛇的LAMP检测方法的敏感性分别为400、4、4 copies · μL-1。特异性试验结果显示,试验建立的LAMP体系能特异性检测目标蛇源中药材,可用于市售商品的检测。结论：试验建立的LAMP体系具有操作简便,灵敏度高,耗时少等优点,可为基层动物源性中药材可视化检测提供参考。

关键词：环介导等温扩增（LAMP）,动物源中药,可视化检测,金钱白花蛇,蕲蛇,乌梢蛇,

基金资助：吉林省科技发展计划（20210204127YY;20220204038YY）;吉林省中医药科技项目（2024163）,吉林省教育厅科学研究项目（JJKH20251344KJ）