转化生长因子-β信号传导抑制剂兴奋剂检测方法的开发与评估*

来源：药物分析杂志2026年第6期北京时间：

作者：刘凯枫, 刘新超, 牛程帅, 周鑫淼, 何森

单位：1.北京体育大学运动人体科学学院,北京 100084;2.北京体育大学北京兴奋剂检测实验室,北京 100029

摘要：目的: 建立适用于尿液和血清样本中转化生长因子β（TGF-β）信号传导抑制剂类兴奋剂的初筛与确证方法,满足兴奋剂检测要求。方法: 采用磁珠法对人激活素受体Ⅱ A（ActR Ⅱ A-Fc）以及罗特西普进行富集,通过N-月桂酰肌氨酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SAR-PAGE）分离富集产物,随后利用蛋白免疫印迹鉴定分离产物。优化免疫纯化、免疫印迹抗体以及孵育条件,建立检测方法并完成包括选择性、可靠性、检测限等方法学验证。结果: 本研究成功建立了ActR Ⅱ A-Fc以及罗特西普的兴奋剂初筛以及确证检测方法。方法学结果表明,无论在尿液以及血清样品中,初筛以及确证检测阳性样本检出率均为100%,未出现假阳性假阴性结果,初筛方法中ActR Ⅱ A-Fc、罗特西普在尿液样本中检测限分别为0.3、2.7 pg · mL-1,在血清样本的检测限分别为10、30.6 pg · mL-1,尿液样本的确证方法两种物质检出限分别为0.49、0.69 pg · mL-1,血液样本的确证方法检出限分别为15.3、20.4 pg · mL-1,初筛以及确证方法两种物质的回收率均能满足检测要求。结论: 本研究所建立的TGF-β信号传导抑制剂的兴奋剂检测方法快速高效,灵敏稳定,可用于兴奋剂常规检测。

关键词：TGF-β信号传导抑制剂,促红素受体激动剂类物质,兴奋剂检测,免疫亲和纯化,蛋白免疫印迹,

基金资助：2024年国家体育总局重大科技创新项目（24ZDKJCX10）;2024北京体育大学自主科研课题北京兴奋剂检测实验室专项课题（NADL2024A02）