重组人乳头瘤病毒11型L1蛋白病毒样颗粒理化特性表征*

来源：药物分析杂志2026年第6期北京时间：

作者：张涛, 李坤, 何静, 左晨阳, 林涛, 蔡峰

单位：1.成都生物制品研究所有限责任公司,成都 610023;2.四川省药品检验研究院,成都 611731

摘要：目的: 对重组人乳头瘤病毒11型（HPV11）L1蛋白病毒样颗粒（VLP）进行理化特性表征。方法: 采用液质联用技术分析HPV11 L1 VLP氨基酸序列和翻译后修饰,采用傅里叶变换红外光谱和圆二色谱技术分析蛋白质二级结构,采用动态光散射与透射电镜技术分析VLP颗粒形态,采用质谱技术测定HPV 11 L1蛋白精确分子量,采用全柱成像毛细管等电聚焦技术测定VLP等电点,采用微量差示扫描量热技术分析VLP的Tm值,采用荧光法测定游离巯基含量,采用反相高效液相色谱和分子排阻色谱从L1蛋白和VLP 2个层面分析其纯度。结果: HPV11 L1 VLP氨基酸序列覆盖率达到100%,与理论序列一致,翻译后修饰主要是位于N端第一位蛋氨酸的乙酰化,修饰率为100%,实测HPV11 L1蛋白分子量为55 894 Da,与理论分子量一致,傅里叶变换红外光谱与圆二色谱的图谱批间一致性良好,动态光散射测得HPV11 L1 VLP粒径为78.92 nm,PDI为0.096,透射电镜测得HPV11 L1 VLP形态完整,等电点为7.43,Tm值为62.54、68.26和81.77 ℃,游离巯基不超过总游离巯基含量的3%,HPV11 L1蛋白RP-HPLC纯度为96.36%,VLP SEC-HPLC纯度为100%。结论: HPV11 L1 VLPs氨基酸序列表达完整且准确,颗粒大小均一,空间结构准确,纯度高,本研究为宫颈癌疫苗的药学研究奠定了基础。

关键词：人乳头瘤病毒11型,病毒样颗粒,蛋白质结构,蛋白质翻译后修饰,蛋白质表征,L1蛋白,

基金资助：国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量控制与评价重点实验室开放课题（2024-KFKT-005）;聚源兴川人乳头瘤病毒（HPV）疫苗产业化项目（2024ZHCG0187）