基于LC-MS技术测定抗体药物中游离脂肪酸含量

来源：药物分析杂志2026年第7期北京时间：

作者：欧阳子均, 邢占磊, 胡楠, 黄德凤, 王晖, 陈熙, 李纲, 宋兰坤

单位：1.迈威（上海）生物科技股份有限公司,上海 201203; 2.安捷伦科技（中国）有限公司,上海 200000

摘要：目的: 基于ICH Q14分析方法开发指南的分析质量源于设计（AQbD）理念,开发LC-MS方法测定抗体药物中月桂酸、肉豆蔻酸和油酸3个游离脂肪酸的含量,并进行方法学验证。方法: 首先设定分析目标概况（ATP）,结合文献及实验室经验,选择超高效液相色谱（1290 UHPLC）与单四极杆质谱（MSD）联用仪进行方法开发。从样品预处理到LC-MS检测,将操作步骤中可能影响分析方法性能的因素全部列出,同时评估其对分析方法准确度和精密度的潜在影响。在控制策略上,对高风险/高成本因素进行控制,对色谱柱、流动相、梯度洗脱或等度洗脱、柱温和质谱仪的毛细管电压、碎裂电压和雾化器压力进行试验,开发适用于聚山梨酯（吐温）降解产物的定量分析方法,并按照ICH Q2要求进行方法学验证。结果: 经方法学验证,上述基于LC-MS技术的游离脂肪酸含量测定方法,其月桂酸、肉豆蔻酸和油酸加标回收率为82.3%~106.6%,线性范围为0.01~2.00 μg · mL-1,最低定量限低于0.01 μg · mL-1,抗体制剂中的蛋白和辅料成分无干扰。应用该方法分别测定有效期内和过期的抗体制剂,以及在研的2组抗体制剂强降解样品中的月桂酸、肉豆蔻酸和油酸含量。在强降解样品中发现月桂酸、肉豆蔻酸和油酸含量均显著升高,提示存在聚山梨酯降解。说明所开发的方法性能符合ATP的预设要求,可用于不同抗体药物中游离脂肪酸的定量检测。结论: 本文提供了一个应用AQbD理念开发LC-MS方法的案例,通过控制试验材料、测量过程与操作规范,对质谱仪气体和电压等参数的允许范围进行实验验证,最终方法的质谱参数是一个范围而不是某一个确定的数值,这对于方法的生命周期,特别是变更管理很有价值。所开发的方法可用于抗体中吐温降解产物游离脂肪酸的定量。同时,此案例对LC-MS方法用于药物质量控制具有较好的借鉴意义。

关键词：分析质量源于设计（AQbD）,游离脂肪酸,聚山梨酯降解,抗体药物,单四极杆质谱,