猪RIG-I真核表达载体的构建及其抗口蹄疫病毒作用研究

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第4期北京时间：

作者：王国庆，朱紫祥，曹伟军，杨帆，毛箬青， 李丹，刘磊，郑海学

单位：1.甘肃农业大学 动物医学院，兰州 730070；2.中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 国家口蹄疫参考实验室，兰州 730046

摘要：为研究模式识别受体分子RIG-I是否具有抑制口蹄疫病毒(FMDV)复制的作用，本研究从猪的PK15细胞中提取RNA，通过分段扩增与融合PCR的方法，扩增猪的RIG-I的完整CDS序列，进一步构建猪RIG-I的真核表达质粒。通过Western blotting和间接免疫荧光试验对构建的真核表达质粒进行表达验证，证明其成功表达，同时证明猪RIG-I蛋白定位于细胞的细胞质中。感染试验发现FMDV能够诱导细胞内RIG-I的转录上调，这表明两者间存在着重要联系。过表达试验证实RIG-I具有抑制FMDV复制的作用，而下调表达RIG-I可以促进FMDV的复制，这表明RIG-I在机体抗口蹄疫病毒感染过程中发挥着重要作用。本研究的开展，为进一步探索RIG-I抗口蹄疫病毒的分子机制提供了理论支持；为口蹄疫病毒感染过程中，天然免疫系统抗病毒机制研究奠定了基础。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金项目（31302118；31402179）；甘肃省杰出青年基金项目（145RJDA328）；甘肃省科技重大专项项目(1302NKDA027)；国际原子能项目（16025/R0）