猪miR-135a-5p预测靶基因APC的鉴定

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第4期北京时间：

作者：陈晨，邓缘，任慧波，朱吉，胡雄贵，蒋思文，彭英林

单位：1.湖南省畜牧兽医研究所，长沙 410131； 2.华中农业大学动物科技学院，武汉 430070

摘要：本研究旨在鉴定猪miR-135a-5p靶向脂肪发育的相关基因。首先，利用生物信息学软件分析发现，结肠腺瘤性息肉病（APC）基因的3′ 非翻译区（3′ UTR）具有两个与猪miR-135a-5p结合的潜在位点。其次，构建APC基因野生型（APC 3′ UTR）和突变型（APC 3′ UTR m1、APC 3′ UTR m2、APC 3′ UTR m3）3′ UTR双荧光素酶载体，并分别将其与miR-135a-5p mimics、阴性对照（NC）共转染PK-15细胞后检测荧光活性。结果显示：miR-135a-5p mimics显著降低APC 3′ UTR和APC 3′ UTR m2载体的荧光活性（P<0.05），而APC 3′ UTR m1和APC 3′ UTR m3载体的荧光活性得到完全恢复，表明miR-135a-5p主要结合在预测的第一个位点。进一步的分析表明，miR-135a-5p抑制猪前体脂肪细胞内源APC基因的mRNA和蛋白质表达水平。研究结果证实，猪miR-135a-5p靶向APC基因，且调控其表达。本试验为深入研究猪miR-135a-5p的生物学功能及其调控脂肪形成的作用机制提供了基础。

关键词：

基金资助：湖南省科技计划项目（2014NK3036）；国家自然科学基金（31401097）