TALENs编辑绵羊成纤维细胞FGF 5基因

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第5期北京时间：

作者：皮文辉，周平，王立民，唐红，郭延华，张译元，刘守仁，王新华

单位：新疆生产建设兵团绵羊遗传改良和健康养殖重点实验室，石河子 832000

摘要：类转录激活因子效应物（Transcription activator-like effector，TALE）已经成为基因组编辑和基因转录调控的有效工具，在多个物种的基因组中实现特定位点的删除、插入和突变。针对绵羊成纤维细胞生长因子5（Fibroblast growth factor 5，FGF 5）基因起始密码子ATG位点，设计构建TALENs（Transcription activator-like effector nucleases，TALENs）。通过比较分析正常培养和基因组编辑处理的绵羊成纤维细胞，电转TALENs组合，Surveyor突变检测，筛选获得1对有效的TALENs。有限稀释细胞传代培养，PCR扩增FGF 5基因片段，经PAGE检测筛选发生突变的细胞，测序确认FGF 5基因ATG位点产生缺失突变细胞。获得具有编辑活性的TALENs，为该基因的定点编辑奠定基础。Surveyor检测和测序结果表明，在绵羊FGF 5基因ATG起始密码子上游104碱基位点，存在1个G/C单核苷酸多态。

关键词：

基金资助：兵团国际合作（2013BC004）；新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室项目（2013KLS01）；国家自然科学基金项目（31360276）；国家重点基础研究发展计划（973计划）（2015CB150300）