乌骨鸡黑色素细胞体外原代培养及鉴定

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第6期北京时间：

作者：韩德平，王书祥，张媛媛，杨祖，李俊英，邓学梅

单位：中国农业大学动物科技学院，畜禽遗传改良北京市重点实验室，北京 100193

摘要：旨在建立乌骨鸡黑色素细胞体外培养和鉴定的方法，为研究黑色素细胞功能提供理想的生物材料。本研究选取乌骨鸡腹膜组织，采用DispaseⅡ和胰酶-EDTA混合消化法，经严格控制不同培养阶段的消化时间，对黑色素细胞进行纯化和传代，获取了乌骨鸡黑色素细胞。通过观察各个培养阶段的细胞形态和细胞生长曲线，表明在专用培养基条件下，细胞增殖良好。根据细胞形态特征、电镜下的亚细胞结构、黑色素合成相关基因的表达分析、DOPA染色和细胞免疫化学染色鉴定，表明所获得的细胞符合黑色素细胞特征。细胞经传代后培养至第10代，仍保持了正常的生物学特性，说明所建立的培养体系可以实现乌骨鸡黑色素细胞体外原代培养。综上表明，本研究成功建立了乌骨鸡黑色素细胞体外分离培养体系。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31472082）；国家863计划（2013AA102501）；中央高校基本科研业务费专项资金（2014BH003）