SLA-Ⅰα链和β链的原核表达与抗血清制备

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第7期北京时间：

作者：刘莹，杜吉革，盖新娜，周磊，郭鑫，杨汉春

单位：中国农业大学动物医学院 农业部动物流行病学与人兽共患病重点实验室，北京 100193

摘要：猪主要组织相容性复合体Ⅰ类分子又称猪白细胞抗原Ⅰ类分子（SLA-Ⅰ），参与内源性抗原在体内的递呈过程，其结构包括重链（α链）和轻链（β链）两部分。本研究首先采用RT-PCR从原代猪肺泡巨噬细胞（PAM）中扩增出SLA-Ⅰ α链胞外区基因和β链基因；继而利用原核表达系统获得包涵体形式表达的SLA-Ⅰ α链胞外区和β链重组蛋白质；将目的重组蛋白质洗涤、复性、纯化后，经Western blot及质谱技术进行验证。以纯化的重组蛋白质免疫兔制备抗血清，经间接ELISA检测其效价达1∶256 000。以制备的抗血清进行Western blot和间接免疫荧光试验，结果显示，所制备的抗血清能够特异性地识别原代及传代PAM表达的SLA-Ⅰ α链及β链蛋白。研究结果不仅为SLA-Ⅰ类分子的功能研究提供了有用的分析试剂，也为病毒感染的免疫机制研究奠定了必要的基础。

关键词：

基金资助：教育部博导基金（20120008110039）；国家973项目（2014CB542701）