H7亚型和N9亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第7期北京时间：

作者：罗思思，谢芝勋，谢丽基，邓显文，谢志勤，黄娇玲，曾婷婷

单位：广西壮族自治区兽医研究所 广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁 530001

摘要：应用反转录环介导等温扩增技术（RT-LAMP），建立一种H7亚型和N9亚型禽流感病毒（AIV）可视化快速检测方法。根据GenBank中H7亚型和N9亚型AIV HA和NA基因序列，在其保守区域设计筛选出H7亚型和N9亚型AIV的特异性LAMP引物各一套，优化反应条件，建立能检测H7亚型和N9亚型AIV RT-LAMP方法，并进行特异性和敏感性检验。结果显示，该法用实时浊度仪63 ℃反应1 h，能特异性地检测H7亚型和N9亚型AIV，而对其他15个H亚型和8个N亚型的AIV和禽类呼吸道病原体均无扩增，最低能检出10 拷贝•μL-1目的基因。所建立的H7亚型和N9亚型RT-LAMP方法特异性强、敏感性高，结果可视化，操作简便、快速，为H7、N9和H7N9亚型AIV的有效防控提供技术支撑，具有较好的应用前景。

关键词：

基金资助：广西特聘专家专项 ( 2011B020)；广西科技攻关重大专项 (14121003-4-2；1222003-2-4)