牛囊胚ICM克隆多能性标记基因与表面标记的研究

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第7期北京时间：

作者：崔莉莎，赵学明，郝海生，杜卫华，马友记，朱化彬，王宗礼

单位：1.甘肃农业大学动物科学技术学院，兰州 730070； 2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193

摘要：本研究旨在探究牛类胚胎干细胞（Embryonic stem cells，ES）的多能性标记基因与表面标记，为优化牛类ES细胞培养条件和相关研究提供依据。利用2i/LIF培养液，通过全胚接种及机械传代法分离培养牛囊胚内细胞团（Inner cell mass，ICM），免疫荧光染色法检测其多能性标记基因与表面标记；qRT-PCR检测免疫磁珠法分选的牛囊胚ICM和滋养层细胞（Trophectoderm cell，TE）的多能性标记基因的差异表达结果。试验成功分离出了牛囊胚ICM克隆，并体外培养至第10代，且各代克隆均呈现出了典型的干细胞形态。结果表明，ICM表面标记SSEA1、SSEA4和TRA-1-60染色为阳性，且多能性标记基因OCT4、SOX2和NANOG在其中均有表达；OCT4、SOX2和NANOG在牛囊胚ICM和TE中的表达存在差异（P<0.05），其中 SOX2 的差异极显著（P<0.01）。综上表明，2i/LIF培养液有助于牛囊胚ICM的培养；SOX2可能成为牛ICM克隆的候选多能性标记基因。

关键词：

基金资助：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所家畜胚胎工程与繁殖创新团队（ASTIP-IAS06-2014）；中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（2014ywf-yb-2）