检测胸膜肺炎放线杆菌7型抗体的竞争ELISA方法的建立与应用

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第10期北京时间：

作者：李树清，陈志飞，张强，吴建祥，刘雨潇，王巧全，林颖峥，宋青，唐智芳，陆承平

单位：(1.上海出入境检验检疫局，上海 200135；2.浙江大学，杭州 310058；3.上海交通大学农业与生物学院，上海 200240；4.南京农业大学，南京 210095)

摘要：针对猪传染性胸膜肺炎（App）最主要的流行血清型7型，建立该型特异的抗体检测方法，并应用于出入境检疫。使用App 7型参考菌株制备单克隆抗体，基于辣根过氧化物酶标记的单抗，建立检测App 7型抗体的竞争ELISA方法，用于检测出入境临床采集及免疫接种的猪血清样品，并与商品化进口试剂盒进行比较。结果显示制备的单抗为IgM，与App 7型参考菌株之外的其他14个血清型以及27株其他相关菌株均无交叉反应。建立的竞争ELISA方法只能检测App 7型抗体，特异性好。用该方法检测App 7型参考菌株免疫猪的血清，免疫后14 d可检出抗体，35 d抗体滴度达峰值，并维持此滴度至143 d。使用建立的竞争ELISA检测免疫猪及临床血清样品260份，结果与法国IDvet试剂盒检测符合率为97.2%，与加拿大Biovet试剂盒检测符合率为97.9%～98.2%。建立的竞争ELISA方法可以应用于App 7型抗体的检测。

关键词：

基金资助：上海出入境检验检疫局科研专项（HK004-2008）