猪肾细胞源三种蛋白质对猪圆环病毒2型复制的调节作用

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第11期北京时间：

作者：张辉，唐青海，黄立平，危艳武，刘长明

单位：1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室，哈尔滨 150001；2.南阳师范学院 南阳市兽医生物工程技术研究中心/昆虫生物反应器河南省工程实验室，南阳 473061

摘要：为了验证猪肾细胞系（PK-15）源3种蛋白质基因（AP2α2、Elf4和ISCU）表达水平对猪圆环病毒2型（PCV2）复制的调节作用，采用RT-PCR扩增这3种蛋白质编码基因，构建真核表达载体；同时设计这3种蛋白质的RNAi片段，分别插入到pGPU6-GFP载体构建shRNA干扰载体。以荧光定量PCR法检测干扰效率，选取干扰效率较高的干扰载体，利用G418筛选转染真核表达载体或干扰载体后的PK-15细胞。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）法检测PCV2 LG毒株在这些细胞中的复制效率。结果表明，Elf4蛋白和ISCU蛋白基因过表达能够显著增强PCV2的复制；而AP2α2蛋白基因过表达对PCV2的复制无显著影响。AP2α2、ISCU和Elf4这3种蛋白质基因被干扰表达后均可降低PCV2复制效率，表明这3种宿主细胞蛋白质对该病毒复制具有调节作用。

关键词：

基金资助：国家自然基金青年基金（31101837）