牛肠道病毒2型单克隆抗体的制备及其应用研究

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第11期北京时间：

作者：郭金玉，张鹤晓，吴丹，高志强，张冉，张乐萃

单位：1.青岛农业大学动物科技学院，青岛 266109；2.北京出入境检验检疫局，北京 100026；3.北京森康生物技术开发有限公司,北京101400

摘要：旨在制备牛肠道病毒2型（BEV-2）单克隆抗体，建立检测BEV-2抗原的ELISA方法。将纯化的BEV-2 VP1+重组蛋白质接种BALB/c小鼠，取其脾淋巴细胞与骨髓瘤细胞SP2/0用PEG4000进行融合，对杂交瘤培养上清进行筛选,获得2株稳定分泌抗BEV-2 VP1+蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株（1G1、5G6）。用制备的单克隆抗体包被酶标板，通过一系列的优化，建立了BEV-2双抗夹心ELISA检测方法。建立的ELISA方法检测BEV-2病毒量的最低限为100 TCID50•0.1 mL-1，与BVDV、IBRV、BLV等病毒无交叉反应。本研究首次制备了牛肠道病毒2型单克隆抗体，建立了检测BEV-2抗原的双抗体夹心ELISA方法，该方法特异性强、敏感性高、重复性好，为进一步研究和开发快速诊断牛肠道病毒试剂盒奠定了基础。

关键词：

基金资助：国家质检总局科研项目(2013IK026)