检测猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒的cDNA芯片的构建

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第12期北京时间：

作者：滑翔，胡中凯，黄小波，文心田，曹三杰，文翼平，伍锐，邓静，赵松，尹人杰，常晓霞，欧阳达，张仙

单位：(1.四川农业大学动物医学院，猪病研究中心/动物传染病与基因芯片室，成都 611130；2.崇州市农村发展局，崇州 611200

摘要：猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)是三种常见的仔猪病毒性腹泻病原，作者拟构建可同时检测三种病原的cDNA基因芯片。分别根据PEDV基因（S、M）、TGEV基因（S、N）、PoRV基因（VP7、NSP4）的保守区设计引物扩增靶基因，进行PEDV-TGEV-PoRV的cDNA阵列设计，建立了扩增标记探针的多重PCR方法，并对所构建cDNA芯片的特异性、灵敏性、重复性进行了评价。确定了该cDNA芯片的阳性判断标准：SNR大于或等于2.0（或信号强度中位值大于等于1 500）。PEDV-TGEV-PoRV诊断cDNA芯片具有良好的特异性，该芯片不与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病病毒发生交叉反应；芯片的最低检测质量浓度为20 pg•μL-1；同一张芯片可重复使用至少7次。本研究为鉴别三种仔猪病毒性病的鉴别诊断提供了新的高通量检测技术。

关键词：

基金资助：公益性行业（农业）科研专项项目（201203056）