免疫共沉淀筛选牛卵泡CART相互作用蛋白的研究

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第12期北京时间：

作者：李鹏飞，孟金柱，刘岩，黄洋，陈建伟，姜晓龙，曹霞，姚晓磊，赵妙妙，吕丽华

单位：(1.山西农业大学生命科学学院，太谷 030801；2.山西农业大学动物科技学院，太谷 030801)

摘要：旨在研究牛卵泡发育过程中可卡因-苯丙胺调节转录肽（Cocaine-and amphetamine-regulated transcript，CART）相互作用蛋白（Protein-protein interaction，PPI）。选择4头10月龄同期发情的健康母牛，B超检测卵泡达8~12 mm，屠宰并采集、分离卵泡颗粒细胞（Granulosa cells，GCs）后，进行总蛋白提取，兔抗CART一抗沉淀CART及其相互作用蛋白，经Protein G-Agarose磁珠吸附分离，多次洗涤去除盐分和杂蛋白，洗脱蛋白复合体并酶解，LC-ESI-Q-TOF质谱分析(Mass spectrometry，MS)及数据库比对。结果显示：共鉴定蛋白质组分111个；经Cytoscape V3.1.0分析，有81个蛋白符合功能模块，并构建蛋白相互作用网络图；同时对相互作用蛋白进行功能富集性分析，共分为3大类34组：其中分子功能占11.73%，生物学过程占46.93%，细胞组分占41.34%。α2巨球蛋白（A2M）和波形蛋白（VIM）与CART相互作用的相关系数最大； CART与NALP1、 SERPINH1和PDIA6具有负调控应答的功能，提示可能参与牛卵泡发育过程的调控。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（31172211）；农业部948项目（2010-Z43）；山西省横向协作与委托项目（2010HX54）；山西省回国留学人员科研资助项目（2014-重点5）；山西省科技攻关项目（20130311027-2）；山西省人事厅人才引进项目；山西农业大学引进人才博士科研启动费(2014ZZ04)；科研管理费资助重大项目和标志性成果培育项目（71060003）