山羊卵巢维持基因FOXL2启动子活性及调控区域分析

来源：畜牧兽医学报杂志2015年第12期北京时间：

作者：耿立英，张宇，李祥龙，周荣艳，李兰会，王志刚

单位：1.河北科技师范学院，秦皇岛 066600； 2.河北农业大学动物科技学院，保定 071000

摘要：旨在研究山羊卵巢维持基因FOXL2启动子活性以及探究该基因的调控机理。从NCBI数据库调取FOXL2基因启动子序列，用生物信息学软件对其核心启动子和转录因子进行预测分析。使用 PCR技术克隆FOXL2基因启动子序列，并构建一系列缺失载体，瞬时转染293T和A375细胞，利用双荧光素酶基因检测仪测定相对荧光素酶活性值。结果表明，该基因启动子区域存在两个典型的CpG岛，分别位于（-920/+51（972 bp））和（+125/+555（430 bp））区域；经Kpn Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切鉴定表明，重组载体质粒构建正确；在细胞中插入不同长度的FOXL2基因启动子片段，随着启动子5′端截短，荧光素酶转录活性先升高再逐渐降低。（-934/+324）区域存在转录活性，（-32/+324）区段包含了转录的基本元件；（-934/-456）区域在转录过程中对FOXL2基因起负调控作用，（-456/-192）区域为正调控区域。

关键词：

基金资助：河北省高校创新团队领军人才培育计划（LJRC004）