梅花鹿致敏与休眠鹿茸干细胞差异蛋白表达的2D-DIGE分析

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第1期北京时间：

作者：董振，王权威，刘振，孙红梅，李春义

单位：中国农业科学院特产研究所，特种动物分子生物学国家重点实验室，长春 130112

摘要：旨在对梅花鹿(Cervus nippon)致敏鹿茸干细胞与休眠鹿茸干细胞表达蛋白进行差异筛选、鉴定及生物信息分析，为深入探讨鹿茸独特的再生分子调节机制奠定基础。本研究采用双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimensional fluorescence difference in gel electrophoresis，2D-DIGE)分离蛋白样品；利用DeCyder 7.2 分析软件对2D-DIGE图像进行统计学分析寻找差异表达蛋白；利用MALDI-TOF-MS (Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight tandem mass spectrometry)鉴定差异蛋白，通过Mascot 软件搜索NCBInr 数据库寻找匹配的蛋白；采用PANTHER (Protein Analysis Through Evolutionary Relationships) 软件对差异蛋白进行聚类分析，REACTOME数据库分析差异蛋白所参与的信号通路。结果得到了致敏鹿茸干细胞与休眠鹿茸干细胞2D-DIGE图谱，致敏鹿茸干细胞与休眠鹿茸干细胞蛋白丰度相比较，比值≥1.1倍以及比值≤-1.1倍(P＜0.05)的差异蛋白点有159个，其中110个上调表达，49个下调表达，EDA(Extended data analysis)分析得到了多个Marker蛋白，质谱鉴定了84 个差异蛋白质点，48个为阳性结果，共来自27 种蛋白质。并对已鉴定蛋白进行了GO分析以及信号通路富集分析。致敏鹿茸干细胞与休眠鹿茸干细胞蛋白差异明显，质谱鉴定获得了来自多种可能与鹿茸再生相关的差异蛋白。由此可知，鹿茸再生是鹿茸干细胞从休眠到致敏的转化过程，需要多种蛋白分子以及信号通路的综合调控。

关键词：

基金资助：国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA100603)；国家自然科学基金项目(31170950)；吉林省重点科技攻关项目（20150204071NY）；吉林省自然科学基金项目（20140101139JC）