猪lipasin基因的克隆及其对肝细胞LPL基因转录的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第2期北京时间：

作者：李曼曼，温丙言，朱河水，钟凯，杨国宇，王月影

单位：河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室，郑州 450002

摘要：旨在克隆猪lipasin 基因，并检测其对肝细胞LPL基因转录的影响。本试验利用同源电子克隆技术克隆猪lipasin基因，构建其真核表达载体转入肝细胞，探讨其对LPL基因转录的影响。结果表明，成功克隆了猪lipasin基因，目的片段大小为615 bp，上传至GenBank(登录号：KF017598)，开放阅读框为594 bp，编码197个氨基酸，liapsin蛋白的分子量和等电点分别为21.99 ku和6.79；成功构建了真核表达载体PB-EGFP-lipasin，实现lipasin基因在肝细胞中的过表达，与对照组相比，PB-EGFP-lipasin转染的细胞中LPL基因的转录水平显著下降。结果提示，猪lipasin可能通过抑制肝细胞LPL的转录影响脂代谢。

关键词：

基金资助：农业部“948”重点计划（2011-G35）；农业部转基因重大专项（2014ZX0801015B）；河南省重点科技攻关项目（112102310705）