《畜牧兽医学报杂志》发表论文赏析
作者:刘妍,梁辉煌,刘玉兰,唐中林,汪文俊,张晶
单位:1.武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点实验室,武汉 430023;2.中南民族大学生命科学学院,武汉 430074;3.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193
摘要:以C2C12肌管细胞为试验材料,探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症反应对肌管蛋白降解相关基因及信号通路的影响。选取不同质量浓度(10、100、1 000 ng•mL-1)的LPS分别刺激C2C12肌管细胞30 min和3 h,通过RT-qPCR 检测炎症因子TNF-α和IL-6的基因转录,确定LPS最佳刺激浓度以建立细胞炎症模型。用最佳浓度LPS分别刺激C2C12肌管细胞0 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h,RT-qPCR检测MAFbx基因和MuRF基因在不同时间点的转录量变化。此外,1 000 ng•mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12 h后,Western blot检测AKT/FOXO1、mTOR和P38信号通路相关蛋白质的表达情况。结果表明:LPS刺激C2C12肌管细胞的最佳浓度为1 000 ng•mL-1,在作用30 min和3 h时均能显著上调TNF-α、IL-6的基因转录,而在刺激12和24 h时MuRF1、IL-1β、IL-6和TLR4的基因转录显著上调。此外,1 000 ng•mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12 h时,仅AKT和FOXO1蛋白磷酸化水平明显降低。基于以上结果,推测LPS通过调控AKT/FOXO1信号通路诱导C2C12肌管细胞MuRF1转录。
关键词:
基金资助:湖北省自然科学基金(2013CFA029;2015CFB514)