表达柔嫩艾美耳球虫HMGB1基因质粒DNA的免疫效果分析

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第2期北京时间：

作者：顾有方，李文超，汪凯，靳二辉，胡倩倩，李升和，陈会良

单位：(安徽科技学院动物科学学院，凤阳 233100)

摘要：旨在评价表达柔嫩艾美耳球虫（E.tenella）HMGB1基因质粒DNA免疫对同源株攻虫的免疫保护效果。将EtHMGB1基因插入pcDNA3.1(-)/myc-His A真核表达载体中，并在Hela细胞中进行体外瞬时表达。设计了pcDNA3.1(-)/myc-EtHMGB1免疫组、pcDNA3.1(-)/myc-His A免疫组、重组蛋白质+FCA佐剂免疫组、pcDNA3.1(-)/myc-EtHMGB1+重组蛋白质联合免疫组、FCA佐剂免疫组、未免疫攻虫组和未免疫未攻虫组7个试验组。分别于14和21日龄对鸡进行两次免疫，28日龄时除未免疫未攻虫组外各组用1×104个E.tenella孢子化卵囊攻虫，以平均增重、卵囊产量和病变记分作为免疫保护效果的评价指标。结果显示，成功构建了pcDNA3.1(-)/myc-EtHMGB1重组质粒，转染后该质粒可在Hela细胞中进行瞬时表达。该重组质粒单独免疫、重组蛋白质单独免疫或重组质粒与重组蛋白质联合免疫均对鸡肠道病变改善效果不明显，但可显著提高增重，降低卵囊产量，尤以重组质粒与重组蛋白质联合免疫效果最佳，显示Prime-boost免疫策略可提高该重组质粒的免疫保护效果。上述结果显示HMGB1可作为未来球虫疫苗研制的良好候选抗原之一。

关键词：

基金资助：安徽省教育厅重大项目(KJ2014ZD09)；安徽省教育厅重点项目(KJ2015A189)；安徽省第七批“115”产业创新团队项目；安徽科技学院校级重点项目(ZRC2014406)；安徽科技学院重点学科项目（AKZDXK2015A04）