鸡Perilipin1基因启动子的克隆及分析

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第2期北京时间：

作者：周纬男，史铭欣，乔书培，史洪岩，王宇祥

单位：东北农业大学动物科学技术学院，农业部鸡遗传育种重点实验室，黑龙江省普通高等学校动物遗传育种与繁殖重点实验室，哈尔滨 150030

摘要：旨在研究鸡脂滴包被蛋白基因（Perilipin1，Plin）启动子的结构及特征。本研究采用PCR方法扩增了鸡Perilipin1基因5′侧翼区约2 kb的DNA片段，并对其进行了克隆、测序及生物信息学分析；同时，构建了其全长及系列截短突变的报告基因表达载体，瞬时转染鸡胚成纤维细胞系（DF-1），用双荧光素酶报告基因系统测定了荧光素酶活性，确定了该基因的核心启动子区域。生物信息学分析结果表明，鸡Perilipin1基因的启动子区不存在典型的TATA box结构和CpG岛，但可能存在TFIID、Sp1、AP2、PPAR、RXR、SREBP1、C/EBP、GATA、ER、KLF5等多个转录因子结合位点；报告基因分析结果表明，本研究克隆的鸡Perilipin1基因启动子能够极显著地启动报告基因的表达（P<0.01），并且随着启动子片段由5′端逐渐截短，报告基因活性表现出逐渐增强的趋势，其中-360/-11片段具有最强的报告基因活性。综上表明，鸡Perilipin1基因-360/-11区域的启动子片段具有最强的转录活性，包含该基因的核心启动子序列。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（青年科学基金）项目（31201796）；高等学校博士学科点专项科研基金（20122325120008）；现代农业产业技术体系建设专项资金（CARS-42）