牛MYOZ2基因启动子克隆及活性分析

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第4期北京时间：

作者：王明明，赵志东，李安宁，张亚冉，段美艳，李世军，吴森，王晓宇，昝林森

单位：1.西北农林科技大学 动物科技学院，杨凌 712100； 2.国家肉牛改良中心，杨凌 712100

摘要：旨在克隆测定牛肌原调节蛋白2 基因（Myozenin2，MYOZ2）启动子的全长序列，进行活性区域分析，为牛MYOZ2 基因功能和表达调控机理研究提供理论依据。通过5′RACE方法确定牛MYOZ2基因转录起始位点；采用PCR技术，以牛基因组为模板克隆MYOZ2基因启动子序列。利用在线软件分析启动子区域中可能包含的转录因子结合位点。依据分析结果重新设计引物，构建7 个包含不同缺失片段的双荧光素酶报告基因载体，转染C2C12细胞系，利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动子活性。结果表明，克隆得到牛MYOZ2基因启动子序列2 065 bp，确定MYOZ2基因的转录起始位点；MYOZ2基因片段-84/+125荧光素酶相对活性极显著高于空载体pGL3-Basic（P＜0.01），MYOZ2基因片段-683/+125荧光素酶相对活性极显著高于基因片段-263/+125（P＜0.01）。MYOZ2基因启动子核心区域位于-84/+125 bp，而且MEF2，SRF，MyoD，YY1 等转录因子可能参与MYOZ2基因的转录调控。

关键词：

基金资助：国家“863”计划（2013AA102505）；国家现代农业产业技术体系建设专项（CARS-38）；“十二五”国家科技支撑计划（2011BAD28B04-03）；陕西省科技统筹创新工程计划(2014KTZB02-02)；新疆建设兵团重大科技计划(2014AA001-1)