猪TRIM11基因克隆及其促进猪伪狂犬病毒在体外增殖的研究

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第6期北京时间：

作者：宋爽，曾磊，鲁绍芳，郭珍珍，鲁维飞，韩立强，王江，王月影，褚贝贝，杨国宇

单位：(河南农业大学 农业部动物生化与营养重点开放实验室，郑州 450002)

摘要：为初步研究猪TRIM11的免疫学功能，以猪颌下淋巴结cDNA为模板扩增TRIM11 基因cDNA并对该基因进行了蛋白质结构预测和组织表达谱分析，将该基因与PiggyBac载体相连获得真核表达载体PB-TRIM11，之后转染PK15细胞获得稳定表达细胞系。用猪伪狂犬病毒（PRV）刺激过表达TRIM11 PK15细胞和对照组细胞后，于不同时间收获细胞上清，比较两组细胞上清中病毒滴度变化。结果表明，猪TRIM11的ORF长度为1 407 bp，编码468个氨基酸，该氨基酸序列含有3个TRIM家族保守的结构域。组织表达谱分析显示，猪TRIM11在脂肪组织、肺的表达量较高，而在心、回肠、十二指肠、直肠中的转录量较低。成功克隆了猪TRIM11 cDNA序列并构建了真核转录载体PB-TRIM11，qRT-PCR检测结果表明TRIM11在PK15细胞系中成功表达。检测感染PRV后过表达TRIM11 PK15细胞和对照组细胞上清液病毒的TCID50发现过表达TRIM11组的病毒滴度始终高于对照组。过表达TRIM11有一定的促进PRV增殖的作用，为进一步研究猪TRIM11在天然免疫中的作用奠定了基础。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金（3149600030） ；农业部转基因专项（2014ZX0801015B）；河南省基础与前沿技术研究计划项目（142300413209）