金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路及其转分化的影响

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第7期北京时间：

作者：杨彬，徐丹丹，孙志鹏，赵佳琦，闫博巍，李晓婷，武瑞

单位：黑龙江八一农垦大学动物科技学院，大庆 163319

摘要：为探索金黄色葡萄球菌（S.aureus）对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)TGF-β1/Smad信号通路及其转分化的影响，用热灭活金黄色葡萄球菌（0、10 4，10 5，10 6，10 7和10 8 CFU•mL-1）刺激BMFB，24 h后采用Real-time PCR 方法检测TGF-β1、α-SMA和collagen-Ⅰ mRNA的转录量，Western blot方法检测α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3蛋白的表达量。使用TGF-β1受体特异性抑制剂SB-431542预处理细胞，再用105 CFU•mL-1热灭活金黄色葡萄球菌刺激细胞，24 h后采用Real-time PCR方法检测α-SMA和collagen-Ⅰ mRNA的转录量，Western blot方法检测α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3蛋白的表达量，免疫荧光法检测collagen-Ⅰ蛋白的表达量。结果显示，不同浓度热灭活金黄色葡萄球菌处理细胞的TGF-β1 mRNA的转录量显著升高（P <0.05或P <0.01），其中以105 CFU•mL-1刺激组的TGF-β1 mRNA的转录量最高。不同浓度灭活的金黄色葡萄球菌处理细胞的α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3的表达量均能显著升高（P<0.05或P <0.01），其中以105 CFU•mL-1刺激组的α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3的表达量最高。抑制剂SB-431542能够极显著抑制α-SMA、collagen-Ⅰ及p-Smad2/3的表达量（P<0.01）。结果提示，金黄色葡萄球菌能够通过TGF-β1/Smad信号通路诱导奶牛乳腺成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞，本研究为揭示金黄色葡萄球菌性乳腺炎发生硬化的机制奠定基础。

关键词：

基金资助：黑龙江八一农垦大学博士后启动基金