CRISPR/Cas9技术的应用性研究

来源：畜牧兽医学报杂志2016年第7期北京时间：

作者：舒磊磊，甲芝莲，吴勇浒，索伦，贾丽玲

单位：1.上海交通大学生命科学技术学院，上海 200240；2.上海交通大学系统生物医学研究院，上海 200240；3.上海交通大学医学院附属第九人民医院，上海 200011

摘要：旨在探索CRISPR/Cas9技术的新应用，本研究通过在小鼠遗传操作（Genetic manipulation）中使用该技术，创建了一种在活体组织内研究基因功能的方法。通过胚胎电转、免疫组化和PCR分析等手段，结果发现，针对DCX基因进行编辑，再现了DCX下调导致神经元迁移障碍的表型，说明该技术能够用于小鼠遗传操作中下调基因表达；其次，该技术还成功应用于Pcdhα基因簇的编辑并研究了基因簇恒定区的功能；最后，通过基因型鉴定发现，胚胎电转中使用CRISPR/Cas9会导致目的基因的敲除、反转和重复事件的发生。综上所述，在小鼠胚胎电转中使用CRISPR/Cas9技术，能够成功编辑目的基因，从而实现活体组织内研究基因的在体功能。

关键词：

基金资助：国家自然科学基金(31200825)